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申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過(guò)濾(0.2μm濾膜)后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.

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1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!

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PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái),經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEIMAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無(wú)菌試劑,采用0.1μmPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個(gè)品牌?天津高實(shí)用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

MAXgene GMP是一種cGMP級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定檢測(cè)時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!近期還可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟

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云南525水泥廠家批發(fā)

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42 等 49 人贊同該回答

42.5水泥是一種常用的水泥類(lèi)型,其強(qiáng)度等級(jí)為42.5級(jí),具有較高的抗壓強(qiáng)度和抗折強(qiáng)度,能夠滿足大部分混凝土結(jié)構(gòu)工程的需求。42.5水泥的制造工藝主要包括原料處理、配料、粉磨、均化、包裝等步驟。在制造 。

寧波voc廢氣處理裝置
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第1樓
垃圾 等 47 人贊同該回答

垃圾處理過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的有害氣體,如甲烷、硫化氫等,這些氣體不僅會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生嚴(yán)重影響,還會(huì)影響周?chē)用竦纳钯|(zhì)量。廢氣處理工程可以有效地減少這些有害氣體的排放,提高空氣質(zhì)量和生活質(zhì)量。三、污水處理廠 。

貴州加工噴霧干燥機(jī)設(shè)備價(jià)錢(qián)
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第2樓
使用 等 94 人贊同該回答

使用離心噴霧干燥機(jī)來(lái)對(duì)不同的物料進(jìn)行干燥處理,可以享受到很多的好處。首先,其可以在極短的時(shí)間內(nèi)將物料干燥為粉末,這樣一來(lái)不僅極為有效的提升了干燥效率,而且還省去了一些加工環(huán)節(jié),簡(jiǎn)化了加工流程。另外,采 。

福建四級(jí)壓縮壓縮機(jī)
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第3樓
如何 等 91 人贊同該回答

如何用壓縮機(jī)進(jìn)行保溫保壓?從聯(lián)合壓縮機(jī)入口充入氮?dú)鈱?duì)合成系統(tǒng)進(jìn)行置換、充壓,聯(lián)合壓縮機(jī)與合成系統(tǒng)進(jìn)行打循環(huán),一般根據(jù)合成系統(tǒng)壓力決定系統(tǒng)放空,利用空速來(lái)維持合成塔出口溫度,開(kāi)啟開(kāi)工蒸汽提供熱量,合成系 。

黔西南企業(yè)智能營(yíng)銷(xiāo)常見(jiàn)問(wèn)題
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第4樓
隨著 等 55 人贊同該回答

隨著科技的迅猛發(fā)展和互聯(lián)網(wǎng)的普及,傳統(tǒng)的營(yíng)銷(xiāo)方式已經(jīng)無(wú)法滿足當(dāng)今消費(fèi)者個(gè)性化需求的時(shí)代要求。在這個(gè)信息的時(shí)代,企業(yè)需要更加細(xì)心、智能的營(yíng)銷(xiāo)策略來(lái)吸引和留住消費(fèi)者。智能營(yíng)銷(xiāo)作為一種利用人工智能和大數(shù)據(jù)等 。

杭州塘沽塘德調(diào)節(jié)閥生產(chǎn)制造廠家
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第5樓
調(diào)節(jié) 等 64 人贊同該回答

調(diào)節(jié)閥的特征1、閥芯形狀結(jié)構(gòu)。主要根據(jù)所選擇的流量特性、不平衡力和用戶對(duì)結(jié)構(gòu)上的要求等因素考慮。2、耐磨損性。當(dāng)流體介質(zhì)是含有高濃度磨損性顆粒的懸浮液時(shí),閥的內(nèi)部材料要堅(jiān)硬。3、耐腐蝕性。由于介質(zhì)具有 。

江蘇固態(tài)電容報(bào)價(jià)
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第6樓
CB 等 29 人贊同該回答

CBB19金屬化聚丙烯膜圓軸向電容器特點(diǎn):以金屬化聚丙烯膜作介質(zhì)和電極,用阻燃膠帶外包和環(huán)氧樹(shù)脂密封,具有電性能優(yōu)良,可靠性好,耐溫度高,體積小,容量大等特點(diǎn)和良好的自愈性能。用途:適用于儀器、儀表、 。

棗莊沖壓加工廠家供應(yīng)
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第7樓
通過(guò) 等 17 人贊同該回答

通過(guò)沖壓加工可以有效利用原材料,減少浪費(fèi)的原因如下:1.材料利用率高:沖壓加工是通過(guò)對(duì)金屬板材進(jìn)行沖擊、拉伸、彎曲等成形操作,其模具一般采用閉合結(jié)構(gòu),使得原材料在成形過(guò)程中能夠被充分利用。相比其他加工 。

東莞建筑門(mén)窗空氣聲隔聲檢測(cè)分析儀器
東莞建筑門(mén)窗空氣聲隔聲檢測(cè)分析儀器
第8樓
&e 等 65 人贊同該回答

  根據(jù)住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部《關(guān)于加快綠色建筑和建筑產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化計(jì)價(jià)依據(jù)編制工作的通知》建辦標(biāo)函〔2015〕1179號(hào))和《綠色建筑評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)》(GB/T 50378-2019),為貫徹落實(shí)《廣東省 。

廣西活性炭給料系統(tǒng)
廣西活性炭給料系統(tǒng)
第9樓
粉末 等 16 人贊同該回答

粉末活性炭濕法投加工藝,配置活性炭漿液,通過(guò)螺桿泵投加?;钚蕴克巹┩都訚舛?%~10%,活性炭投加量參考范圍5~30mg/L。活性炭是一種經(jīng)特殊處理的炭,利用其多孔性固體表面,吸附去除水中的有機(jī)物或有 。

新疆天然樹(shù)脂瓦
新疆天然樹(shù)脂瓦
第10樓
在樹(shù) 等 69 人贊同該回答

在樹(shù)脂瓦的選購(gòu)過(guò)程中,除了對(duì)廠家和產(chǎn)品要了解清楚之外,自身的實(shí)際使用情況也必須要清楚,并且要如實(shí)告知廠家,廠家會(huì)根據(jù)每位客戶的情況,去推薦適合使用的樹(shù)脂瓦產(chǎn)品,以下是幾個(gè)常見(jiàn)的樹(shù)脂瓦選購(gòu)要點(diǎn),大家要注 。

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